期刊简介
本刊隶属于中华预防医学会系列杂志。 “以防为主(三级预防),防治并举”为本杂志的办刊宗旨。主要栏目有流行病学与预防医学、基础研究、临床研究、综述与讲座、技术革新与经验交流、论著摘要与病案报道、域外肿瘤研究信息转载、简讯等。为活跃学术气氛,增加著、读、编者间的交流,本刊还将不定期的设置“学术争鸣”栏目。本刊以从事肿瘤基础研究与临床工作者以及大专院校师生为主要读者对象。
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首页>中华肿瘤防治杂志

- 杂志名称:中华肿瘤防治杂志
- 主管单位:齐鲁肿瘤杂志;肿瘤防治杂志;当代肿瘤学杂志
- 主办单位:国家卫生和计划生育委员会
- 国际刊号:11-5456/R
- 国内刊号:11-5456/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊方阵来源刊 ASPT来源刊 中国期刊网来源刊期刊收录:剑桥科学文摘, 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), ASPT来源刊, CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究
翁丹卉;邢辉;邓友星;梁逢奇;黄磊;李芳;马丁;卢运萍
关键词:卵巢肿瘤, RNA干扰, 基因表达, 细胞凋亡
摘要:目的:构建AKT2基因特异性短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,观察RNA干扰(RNAi)技术,对人卵巢癌A2780和SKOV3细胞中AKT2蛋白激酶表达的抑制作用,并探讨其促进细胞凋亡的机制.方法:运用基因工程技术,设计合成针对AKT2 mRNA的特异性shRNA,构建真核表达载体pAKT2-shRNA.将pAKT2-shRNA经脂质体(LipofectamineTM 2000)包裹转染人卵巢癌A2780和SKOV3细胞,荧光显微镜观察细胞内DsRed红色荧光蛋白的表达,计算转染效率,半定量RT-PCR(Semi-quantitative RT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测AKT2的表达及干扰效率,流式细胞学检测法(FACS)检测细胞凋亡率,比较抑制AKT2基因前后卵巢癌细胞抵抗凋亡能力.结果:成功构建了pAKT2-shRNA载体.A2780和SKOV3细胞转染pAKT2-shRNA后,荧光显微镜下观察转染效率约40%;Semi-quantitative RT-PCR和Western blot检测结果示,转染后AKT2 mRNA和蛋白表达均显著降低.FACS检测结果显示,转染pAKT2-shRNA后,紫杉醇25 nmol/L处理细胞12 h,与空白对照组和阴性对照组相比,细胞凋亡率显著增加,P<0.05.结论:构建的pAKT2-shRNA真核表达载体能有效抑制AKT2基因表达;运用RNAi技术,降低卵巢癌细胞中AKT2基因表达水平,能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,促进肿瘤细胞凋亡.
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