期刊简介
本刊隶属于中华预防医学会系列杂志。 “以防为主(三级预防)，防治并举”为本杂志的办刊宗旨。主要栏目有流行病学与预防医学、基础研究、临床研究、综述与讲座、技术革新与经验交流、论著摘要与病案报道、域外肿瘤研究信息转载、简讯等。为活跃学术气氛，增加著、读、编者间的交流，本刊还将不定期的设置“学术争鸣”栏目。本刊以从事肿瘤基础研究与临床工作者以及大专院校师生为主要读者对象。
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首页>中华肿瘤防治杂志
- 杂志名称：中华肿瘤防治杂志
- 主管单位：齐鲁肿瘤杂志；肿瘤防治杂志；当代肿瘤学杂志
- 主办单位：国家卫生和计划生育委员会
- 国际刊号：11-5456/R
- 国内刊号：11-5456/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊方阵来源刊 ASPT来源刊 中国期刊网来源刊期刊收录：剑桥科学文摘, 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), ASPT来源刊, CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
Twist基因转染对人宫颈癌细胞生物学行为影响的观察
杨丞；饶翔；张弦；郑晶
关键词：宫颈肿瘤, 基因, Twist, 转染, 细胞增殖, 细胞迁移, 印迹法, 蛋白质
摘要：目的:构建人Twist基因真核表达载体,并建立稳定高表达Twist的人宫颈癌HCC94细胞系,研究转染前后HCC94细胞生物学行为.方法:用RT-PCR法扩增人低分化宫颈癌HCE1细胞中Twist开放阅读框架,将PCR产物克隆到pZsGreen-C1真核表达载体,构建重组质粒pZsGreen-C1/Twist并鉴定.采用脂质体法把重组载体转染入人高分化宫颈癌HCC94细胞,经G418筛选获得稳定高表达Twist的细胞克隆,并进行荧光,蛋白质印迹法和RealtimeRT-PCR检测；MTT法和侵袭小室实验研究转染前后HCC94细胞的增殖、黏附和迁移能力.结果:成功构建pZsGreen-C1/Twist真核表达载体,筛选出稳定高表达人Twist的p-tw-1克隆,经荧光显微镜观察其转染效率＞70％.Realtime RT-PCR扩增曲线和熔点曲线显示,Twist基因有效扩增,p-tw-1组、p-tw-v(转染空载体)组和HCC94(未转染)组mR-NA相对表达量分别为4.14±2.26、2.03±1.10和1.90±0.78,p-tw-1组相对于其他两组水平明显上调,差异有统计学意义,F=10.24,P=0.001;而对照组之间差异无统计学意义,P=0.146.蛋白质印迹法检测结果显示,Twist基因稳定表达,p-tw-1组、p-tw-v组和HCC94组IOD与GAPDH比值分别为0.65、0.33和0.30.p-tw-1组细胞从第4天起生长趋势快于p-tw-v组和HCC94组,差异有统计学意义,F=24.113,P=0.000;而两对照组之间差异无统计学意义,P=0.229.P-tw-1、P-tw-v和HCC94组平均穿膜细胞数分别为(263.67±18.04)、(126.00±17.69)和(116.33±9.87)个,p-tw-1组细胞数明显增多,差异有统计学意义,F=83.093,P=0.000;p-tw-v与HCC94组之间差异无统计学意义,P=0.478.P-tw-1、P-tw-v和HCC94组黏附细胞平均A值分别为0.38±0.01、0.53±0.01和0.57±0.01,p-tw-1组A值明显降低,差异有统计学意义,F=65.086,P=0.000; p-tw-v组与HCC94组之间差异无统计学意义,P=0.244.结论:Twist基因高表达可增强宫颈癌细胞增殖和迁移能力,降低其黏附能力；Twist真核表达载体和稳定高表达Twist的HCC94细胞系构建为进一步研究Twist功能奠定了基础.
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