期刊简介
本刊隶属于中华预防医学会系列杂志。 “以防为主(三级预防)，防治并举”为本杂志的办刊宗旨。主要栏目有流行病学与预防医学、基础研究、临床研究、综述与讲座、技术革新与经验交流、论著摘要与病案报道、域外肿瘤研究信息转载、简讯等。为活跃学术气氛，增加著、读、编者间的交流，本刊还将不定期的设置“学术争鸣”栏目。本刊以从事肿瘤基础研究与临床工作者以及大专院校师生为主要读者对象。
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首页>中华肿瘤防治杂志
- 杂志名称：中华肿瘤防治杂志
- 主管单位：齐鲁肿瘤杂志；肿瘤防治杂志；当代肿瘤学杂志
- 主办单位：国家卫生和计划生育委员会
- 国际刊号：11-5456/R
- 国内刊号：11-5456/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊方阵来源刊 ASPT来源刊 中国期刊网来源刊期刊收录：剑桥科学文摘, 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), ASPT来源刊, CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
慢病毒介导hsa-mir-203构建及对K562细胞增殖与凋亡影响观察
黎毓光；何金花；韩泽平；吕钰冰；谢杏仪；王莉；邹茂贤
关键词：hsa-miR-203, 人慢性粒细胞白血病细胞, 慢病毒, 增殖, 凋亡
摘要：目的 运用慢病毒载体系统构建人微小非编码RNA(miR-203)的重组慢病毒载体,并感染人慢性粒细胞白血病细胞(K562),观察其对K562细胞增殖与凋亡的影响.方法 合成miR 203的前体序列,克隆至pLVX-IRES-Zs-Green1载体中构建成重组慢病毒质粒pLVX-shRNA2-miR-203(PremiR-203).经酶切和测序鉴定后,采用脂质体将其与包装质粒PLD2及包膜质粒PLD3共转染293T和K562细胞.荧光显微镜观察293T和K562细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达.QRT-PCR检测miR-203在K562细胞中的表达水平,MTT实验检测对K562细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞周期,TUNEL染色观察细胞凋亡形态.采用完全随机设计的单因素方差分析组间差异的显著性.结果 经酶切鉴定和核酸序列测定,293T细胞中GFP表达证实成功包装了携带miR-203基因的重组慢病毒,滴度为1.2×108 TU/mL.重组慢病毒感染K562细胞后,细胞中miR-203基因呈高表达;PremiR 203对K562细胞增殖抑制率24 h为(8.10±0.15)％,高于阴性对照组的(5.16±0.14)％,F=3 499.1,P＜0.001;48 h为(32.4±0.49)％,明显高于阴性对照组的(6.4±0.19)％,F=9439.3,P＜0.001;72 h为(59.0±0.53)％,F=32 865.16,P＜0.001.流式细胞术结果显示,细胞周期比例G1期为38％,S期为54％,G2期为8％.荧光显微镜观察到细胞核碎裂、核质固缩、细胞膜突出等典型的凋亡形态.结论 成功构建重组慢病毒介导hsa-miR-203的表达载体,实现了其在细胞中的稳定表达,并有效抑制K562细胞增殖,并促进细胞凋亡.
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