期刊简介
本刊隶属于中华预防医学会系列杂志。 “以防为主(三级预防)，防治并举”为本杂志的办刊宗旨。主要栏目有流行病学与预防医学、基础研究、临床研究、综述与讲座、技术革新与经验交流、论著摘要与病案报道、域外肿瘤研究信息转载、简讯等。为活跃学术气氛，增加著、读、编者间的交流，本刊还将不定期的设置“学术争鸣”栏目。本刊以从事肿瘤基础研究与临床工作者以及大专院校师生为主要读者对象。
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首页>中华肿瘤防治杂志
- 杂志名称：中华肿瘤防治杂志
- 主管单位：齐鲁肿瘤杂志；肿瘤防治杂志；当代肿瘤学杂志
- 主办单位：国家卫生和计划生育委员会
- 国际刊号：11-5456/R
- 国内刊号：11-5456/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊方阵来源刊 ASPT来源刊 中国期刊网来源刊期刊收录：剑桥科学文摘, 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), ASPT来源刊, CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
抑制Rab25基因表达的人NSCLC厄洛替尼耐药细胞PC9/ER的建立
周建国；罗清；王菲；王怡；张钰；吕水萍；柏玉举；沈刚；石磊；马虎
关键词：Rab25, 非小细胞肺癌, NSCLC, 酪氨酸激酶抑制剂, 耐药, 慢病毒, 稳定细胞株
摘要：目的 Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)等多种肿瘤中过度表达,提示其可能在NSCLC的发生发展及耐药形成中发挥重要作用.为进一步探讨Rab25的功能及其在NSCLC酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)耐药形成中的作用,建立稳定慢病毒介导的shRNA靶向干扰Rab25基因人非小细胞肺癌厄洛替尼耐药细胞PC9/ER稳定株.方法 实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测PC9/ER及PC9细胞中Rab25基因mRNA的相对表达情况.筛选出Rab25基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA并构建GV248 shRNA-Rab25慢病毒载体,酶切和测序鉴定正确后,经病毒包装,感染PC9/ER细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株.RT-PCR鉴定PC9/ER的表达,CCK-8检测对厄洛替尼的敏感性.结果 PC9/ER细胞中Rab25基因的mRNA表达水平显著高于PC9细胞.构建的重组慢病毒质粒经测序鉴定正确.RT-PCR证实,干扰Rab25后,PC9/ER细胞株中Rab25表达水平明显降低,抑制率为88.3％.通过传代10次后,PC9ER-Rab25i稳定细胞株中Rab25基因的mRNA表达水平显著低于阴性对照组,P＜0.05.PC9ER-Rab25i稳定细胞株的IC50为(2.133±0.222) μmol/L,显著低于阴性对照组的(6.375±0.799) μmol/L,P=0.007.结论 成功构建了Rab25-shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制Rab25基因表达的人NSCLC厄洛替尼耐药细胞PC9/ER,初步验证Rab25基因能够改善肺癌EGFR-TKIs获得性耐药,为进一步研究Rab25在NSCLCEGFR-TKIs获得性耐药的机制及逆转其获得性耐药提供了可靠的细胞模型.
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